表观遗传学是研究在基因的核苷酸序列不发生改变的情况下，基因的表达和调控的可遗传变化的一门遗传学分支学科。表观遗传的现象很多，比如RNA介导的基因沉默，组蛋白修饰，DNA甲基化等。其中，DNA的甲基化作为高等真核生物中一个主要的表观遗传学机制，被广泛研究。
近年来涌现出很多 DNA 甲基化的检测技术，常用的DNA甲基化检测方式主要是基于亚硫酸盐修饰预处理的甲基化检测技术。
(重亚硫酸盐转化原理)
天根生化针对DNA甲基化研究中的DNA重亚硫酸盐转化开发一款全新试剂盒。
DNA重亚硫酸盐快速转化试剂盒（离心柱型）（DP225）
简单快速：转化和纯化流程可在2 h内完成，对仪器设备要求较低，操作简便。
转化率高：DNA样品中未甲基化胞嘧啶转化为尿嘧啶的转化率可达99.5%以上。
反应灵敏：DNA样品适用浓度范围在500 pg~2.5 μg之间。
完整度高：处理后的DNA完整度好，得率高。
普适性好：本试剂盒处理后的DNA样品适用于甲基化特异性PCR，测序法及芯片法等后续甲基化分析方法。
实验流程
重亚硫酸盐转化
1. Bisulfite Mix-L3干粉溶解
2. 重亚硫酸盐反应体系配制
3. 重亚硫酸盐转化循环条件
表1重亚硫酸盐反应体系
表2重亚硫酸盐转化循环条件
重亚硫酸盐处理后的 DNA纯化
DP225 实验案例一
转化时间和转化试剂体积对转化率的影响
DNA重亚硫酸盐转化试剂盒转化率评估实验流程
重亚硫酸盐转化循环条件
转化时间和转化试剂体积对转化率的影响
实验结论：
用天根DNA重亚硫酸盐快速转化试剂盒DP225转化1 μg Human Genome DNA+10 ng λ DNA，比较了不同转化试剂体积（100 μl和120 μl）和不同转化时间（50 min (2 cycles), 75 min (3 cycles)和100 min (4 cycles)）对转化率的影响，转化率通过NGS方法评估（流程见上表）。结果显示，转化试剂体积为120 μl时，相比100 μl得到更高的转化率；转化时间为100 min (4 cycles)时 ，相比于更短的转化时间（50 min (2 cycles)和75 min (3 cycles)），得到更高的转化率。
不同品牌的同类产品转化率比较
DNA重亚硫酸盐转化试剂盒转化率评估实验流程
不同品牌的DNA重亚硫酸盐转化试剂盒的转化率比较
实验结论：
用天根DNA重亚硫酸盐快速转化试剂盒DP225和国际主流品牌同类产品转化1 μg Human Genome DNA+10 ng λ DNA，比较各产品的转化率，转化率通过NGS方法评估（流程见上表）。结果显示，DP225具有高的转化率，性能与国际品牌相当甚至更优。
PyroSequencing焦磷酸测序
Sanger测序
建库测序、捕获测序、芯片、panel
甲基化特异性PCR-EM101
高分辨率熔解曲线分析-FP210
探针法qPCR-FP211,FP206
