说到分子克隆或者载体构建
天空飘来六个字:
“分→切→接→转→筛→表”
谁的DNA动了~
简单来说，分子克隆是指将一个特定的DNA片段（基因）插入到一个工程载体（如质粒，噬菌体或病毒）中，形成重组DNA分子，并通过转化、转染或感染等方式将其导入宿主细胞并扩大培养，从而在体外实现目标DNA片段在宿主细胞（或无细胞复制体系）中的大量复制，用于后续实验。分子克隆作为现代生物技术领域的一项核心技术之一，自1970年代诞生以来，已经极大地推动了生物学、医学、农业等多个科学领域的进步。
分子克隆流程示意图
PCR、酶切、连接、转化是传统基因克隆方法获得重组质粒必不可少的步骤。但经典分子克隆存在操作繁琐、耗时长、复杂片段构建难度大成功率低、酶切位点的选择易受到限制等问题，费时费力。
为了解决这些问题，TIANGEN推出便捷、高效的分子克隆快速解决方案，搭配试剂和仪器，为科学工作者提供从制备模板-高保真扩增-电泳-胶回收-载体构建-转化-筛选鉴定-质粒提取-下游实验的完整解决方案，助你又快又好地完成克隆实验，GET理想的实验数据。
TIANGEN分子克隆快速解决方案
1.高保真扩增
Ultra HiFidelity PCR KitⅡ（KP213）
模板普适性：能够识别不同物种、30%～80% GC含量的DNA片段。
延伸力强：可扩增长至20 kb的DNA片段。
高灵敏度：基因组模板用量可低至1 ng。
操作简便：只需加入模板和引物，轻松配好体系，PCR产物平末端，纯化后可直接用于无缝克隆。
2.凝胶回收
琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒 (增强型)（DP219）
——室温溶胶，快速高效完成胶回收
本试剂盒采用可以高效、专一结合DNA的硅基质材料和独特的缓冲液系统，从TAE或TBE琼脂糖凝胶上回收DNA片段，同时除去蛋白质、其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质，回收100 bp-15 kb DNA片段，回收率高达80%，每个离心吸附柱每次可吸附的DNA量为10 μg。
快速：整个操作过程快速方便，十几分钟即可完成回收工作。
便捷：无需平衡液，室温溶胶。
高效：独特的离心柱和精心配制的缓冲液，保证*大量回收到高纯度的目的DNA。
3.无缝克隆
EasyGeno单片段重组克隆试剂盒（VI202-02）
EasyGeno单片段重组克隆试剂盒基于DNA序列同源性进行片段重组，可快速将单个片段定向克隆到任意线性化载体中。通过精心设计和严格试验，本试剂盒含有的2×EasyGeno Single Assembly Mix具有的酶活性可将载体和片段的同源区域从双链的3’端进行重组连接，*终得到的无缺口闭环质粒可直接转化感受态细胞筛选克隆。该方案克服了酶切位点的限制，仅需在插入片段PCR引物5’端引入线性化载体的末端序列，使得插入片段5’和3’两端带有载体两端的一致性序列（15-25 bp），即可实现插入片段的定向重组进入载体。重组反应可在恒温条件下快速进行（50 ℃处理15 min），配合灵活的PCR产物处理方式和快速转化方法，数小时内即可完成从DNA样品准备到重组产物的转化涂板培养的全部操作。
4.转化培养
T-Fast感受态细胞（CB109）
——质粒得率高、生长速度快的感受态细胞
快速生长：菌株生长快速，涂布于琼脂平板后 6 h 可见菌落， 8 h 可挑取单克隆菌落；过夜培养的单克隆菌落于 3 ml 液体LB培养基中培养 4h 即可用于质粒提取。
快速转化：适用于 Ampr 载体的 5 min 快速转化流程。
高质粒得率：相同 OD600 条件下，T-Fast 感受态细胞质粒得率高于 DH5α 20%。
高阳性率：携带lacIq 基因，可更严谨的控制Lac启动子的开启，从而提高篮白斑筛选的阳性率。
5.菌落PCR
2×Taq PCR预混试剂Ⅱ(KT211)
——高效高抗逆性的快速 PCR 预混液
高扩增效率：高效扩增不同大小（长达5kb）、不同来源的DNA片段。
高灵敏度：可从低至 10 pg 的基因组模板中扩增目的片段。
高抗逆性：对于粗提模板 / 菌液等杂质含量高的模板也能轻松扩增目的片段，试剂反复冻融多次不影响扩增效果。
操作简便：只需加入模板和引物,轻松配好体系,特别适合大批量基因鉴定, PCR产物带A,纯化后可直接用T/A载体克
隆。
6.质粒提取
快速质粒小提试剂盒（DP105）
——先进的碱裂解技术，8 min 获得高质量质粒
快速：步骤少，操作简单，仅需 8 min。
高效：可提取菌体 85% 以上质粒 DNA。
配备了独特的 TIANRed 试剂，可以清晰辨明抽提过程中样本的裂解程度，确保得到高效率、高纯度的质粒 DNA。
仪器设备
切胶仪
PCR仪
金属浴
全自动核酸提取仪
方案在手，实验无忧
分子克隆完整解决方案产品列表
