近日，中国科学技术大学鲍坚强团队及其合作者发表于《Nature Communications》的高水平研究论文Efficient high-precision transgene knock-in by Recombinases (Redα/β)-enhanced DNA integration-CRISPR-Cas9 (RED-CRISPR) 提出了一种名为RED-CRISPR的新型基因编辑系统，通过将λ噬菌体来源的Redα/β重组酶与CRISPR-Cas9融合，显著提升了大片段DNA（>1 kb）的精准敲入效率。该技术不仅在多种细胞系中表现优异，还在CAR-T细胞制备、疾病模型构建等领域展现出强大的应用潜力。

RED-CRISPR的工作模型

i) Cas9在宿主基因组位点介导切割产生双链断裂（DSB）；ii) 连接的Redα保持活性，并以5'→3'方向消化DSB末端，产生3'突出末端（长度均匀分布在20-2000 nt之间）；iii) RED-CRISPR系统内的连接Redβ在单链3'突出末端上发挥作用（通过单链配对或招募其他真核重组因子），其机制与大肠杆菌中的不同；iv) 真核DNA聚合酶和连接酶完成修复过程，实现高效的大片段基因组整合。

研究亮点

✅ 高效敲入：HDR效率提升2–5倍，CAR-T细胞敲入效率约45%；

✅ 大片段支持：可成功插入8 kb以上长片段DNA；

✅ 高精准度：显著降低脱靶突变与染色体易位风险；

✅ 广泛适用：适用于细胞系、T细胞、iPSC及小鼠胚胎等多个体系。

Qubit检测专用

本研究的测序文库构建中，采用我司麦伯生物的Qubit系列产品， 进行DNA浓度精准测定，确保高通量测序数据的可靠性与重复性。该产品专为微量DNA/RNA定量设计，是基因组学研究中不可或缺的质控工具。

产品特点

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